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NEB末端修飾酶
——末端磷酸化、去磷酸化、末端補平、末端加A尾

 
北京澤平代理美國進口NEB堿性磷酸酶、T4磷酸激酶、T4 DNA聚合酶、Klenow片段（DNA聚合酶I大片段）、快速末端平齊試劑盒、Taq DNA聚合酶等，用于DNA末端磷酸化、去磷酸化、末端補平/末端平齊化、末端加A尾等。NEB末端修飾酶提供豐富產(chǎn)品選擇，經(jīng)嚴格質(zhì)控，性能穩(wěn)定可信賴。

NEB堿性磷酸酶,T4磷酸激酶,T4 DNA聚合酶,Klenow片段,Taq DNA聚合酶代理商北京澤平

 
一、末端磷酸化——T4 PNK

NEB T4 多聚核苷酸激酶（T4 Polynucleotide Kinase，T4 PNK，貨號M0201），支持對DNA、RNA進行5'末端磷酸化，以進行連接反應(yīng)，并同時具有3'磷酸酶活性，可去除3'磷酸基團，可用于對DNA、RNA進行末端標(biāo)記，作為探針和進行DNA測序。

 
二、末端去磷酸化——堿性磷酸酶

1、NEB蝦堿性磷酸酶（rSAP）

NEB蝦堿性磷酸酶（Shrimp Alkaline Phosphatase，rSAP，貨號M0371），是一種不耐熱的重組堿性磷酸酶，用于DNA、RNA的5'末端和3'末端去磷酸化，可作用于5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端，并可降解PCR反應(yīng)中的游離dNTP。NEB蝦堿性磷酸酶可用于線性化質(zhì)粒DNA去磷酸化防止自連、用于克隆或探針末端標(biāo)記、制備DNA測序和SNP分析模板等。NEB蝦堿性磷酸酶rSAP在65℃下加熱5min可完全且不可逆地失活，無需在連接或末端標(biāo)記前去除，減少純化步驟。


2、NEB熱敏磷酸酶（AnP）

NEB熱敏磷酸酶（Antarctic Phosphatase，AnP，貨號M0289），是不耐熱的重組堿性磷酸酶，反應(yīng)條件靈活，兼容各類限制性內(nèi)切酶緩沖液，無需純化，用于DNA、RNA的5'末端和3'末端去磷酸化，可作用于5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端，并可降解PCR反應(yīng)中的游離dNTP。NEB熱敏磷酸酶可用于防止線性載體自連、制備DNA測序和SNP分析模板。NEB熱敏磷酸酶AnP在80℃下加熱2min可完全且不可逆地失活，無需在連接或末端標(biāo)記前去除，減少純化步驟。


3、NEB快速CIP

NEB快速CIP（Quick CIP，貨號M0525），是熱敏重組型小牛腸堿性磷酸酶，用于DNA、RNA的5'末端和3'末端去磷酸化，可在10min內(nèi)完成5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端的去磷酸化，也可用于降解PCR反應(yīng)中的dNTP。相比小牛腸堿性磷酸酶CIP，NEB快速CIP活性更高，所需酶量更少，降低每次反應(yīng)的成本；無需鋅等額外添加劑，并縮短溫育時間；兼容各類限制性內(nèi)切酶緩沖液，無需純化；快速且不可逆的熱失活特性，減少純化步驟；重組酶具備更高純度、更高批次間一致性、更高性價比。NEB快速CIP在80℃下加熱2min可完全且不可逆地失活，無需在連接或末端標(biāo)記前去除。

 

  重組蝦堿性磷酸酶 M0371 熱敏磷酸酶 M0289 快速CIP M0525
100%熱失活 5min/65℃ 2min/80℃ 2min/80℃
高比活性 ●   ●
改進穩(wěn)定性 ●   ●
直接用于NEB buffers ● ● ●
需額外添加   ●(Zn2+)  
省時步驟     ●


 

 
三、末端補平/末端平齊化

1、NEB T4 DNA 聚合酶

NEB T4 DNA 聚合酶（T4 DNA Polymerase，貨號M0203）， 具有5'→3'方向DNA合成功能，以及很強的3'→5'核酸外切酶活性，可進行缺口填充，切除3'突出末端或補平5'突出末端，形成平末端。NEB T4 DNA 聚合酶不具有5'→3'核酸外切酶活性。


2、NEB DNA 聚合酶I大片段（Klenow片段）

NEB DNA 聚合酶I大片段（DNA Polymerase I, Large Fragment，Klenow片段，貨號M0210），是大腸桿菌（E. coli）DNA聚合酶I的蛋白水解產(chǎn)物，保留了聚合酶活性，以及3'→5'核酸外切酶活性，但不具有5'→3'核酸外切酶活性。


3、NEB快速末端平齊化試劑盒

NEB快速末端平齊化試劑盒（Quick Blunting Kit，貨號E1201），可以將不匹配的DNA 5'或3'突出末端轉(zhuǎn)化為5'磷酸化的平末端，可在30min內(nèi)完成限制性內(nèi)切酶消化的DNA末端平齊化，以便與平末端DNA克隆載體連接。NEB快速末端平齊化試劑盒作為即用型預(yù)混液，可在室溫下反應(yīng)，適用于剪切的、霧化的、經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA進行末端平齊化，以便與質(zhì)粒、粘性質(zhì)粒cosmid、F黏粒fosmid、BAC載體進行連接。

 

 

  T4 DNA 聚合酶 M0203 DNA聚合酶I大片段（Klenow片段） M0210 快速末端平齊化試劑盒 E1201 綠豆核酸酶 M0250
5'突出末端補平 ● ● ●  
3'突出末端切割 ● ● ● ●
5'突出末端切割       ●


 


四、末端加A尾

1、NEB Klenow 片段

NEB Klenow 片段（Klenow Fragment，貨號M0212），重組來源，保留了聚合酶活性、不具有5'→3'核酸外切酶活性，經(jīng)突變（D355A、E357A）去除了3'→5'核酸外切酶活性，可用于向PCR產(chǎn)物的平末端添加A尾。

 
2、NEB Taq DNA 聚合酶

NEB Taq DNA 聚合酶（Taq DNA Polymerase）在PCR反應(yīng)時，可在每條PCR擴增產(chǎn)物末端自動添加一個3'-A突出末端，直接用于T/A連接。NEB提供多種熱啟動Taq DNA聚合酶，滿足各類實驗需求。

 

 

  Klenow片段，3´→5´ exo- Taq DNA 聚合酶
反應(yīng)溫度 37℃ 75℃
熱失活 75℃ 20min 否
核苷酸輔因子 dATP dATP


 

 
北京澤平代理的末端修飾酶（更多產(chǎn)品歡迎咨詢）

 

貨號 英文名稱 中文名稱 包裝規(guī)格
M0210L DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment - 1000 units DNA 聚合酶 I，大片段（Klenow） 1,000 units
M0210S DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment - 200 units DNA 聚合酶 I，大片段（Klenow） 200 units
M0210V DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment - 100 units DNA 聚合酶 I，大片段（Klenow） 100 units
M0210M DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment - 1000 units（High Concentration） DNA 聚合酶 I，大片段（Klenow）（高濃度） 1,000 units
M0490L EpiMark Hot Start Taq DNA Polymerase - 500 reactions EpiMark 熱啟動 Taq DNA 聚合酶 500 rxns
M0490S EpiMark Hot Start Taq DNA Polymerase - 100 reactions EpiMark 熱啟動 Taq DNA 聚合酶 100 rxns
M0212L Klenow Fragment (3'-5' exo-) - 1000 units Klenow 片段（3’→5’exo-） 1,000 units
M0212S Klenow Fragment (3'-5' exo-) - 200 units Klenow 片段（3’→5’exo-） 200 units
M0212V Klenow Fragment (3'-5' exo-)- 100 units Klenow 片段（3’→5’exo-） 100 units
M0212M Klenow Fragment (3'-5' exo-) - 1000 units（High Concentration） Klenow 片段（3’→5’exo-）（高濃度） 1,000 units
M0323L LongAmp Taq DNA Polymerase - 2500 units LongAmp Taq DNA 聚合酶 2,500 units
M0323S LongAmp Taq DNA Polymerase - 500 units LongAmp Taq DNA 聚合酶 500 units
M0534L LongAmp Hot Start Taq DNA Polymerase - 2500 units LongAmp 熱啟動 Taq DNA 聚合酶 2,500 units
M0534S LongAmp Hot Start Taq DNA Polymerase - 500 units LongAmp 熱啟動 Taq DNA 聚合酶 500 units
M0480L OneTaq DNA Polymerase - 1000 units OneTaq DNA 聚合酶 1,000 units
M0480S OneTaq DNA Polymerase - 200 units OneTaq DNA 聚合酶 200 units
M0480X OneTaq DNA Polymerase - 5000 units OneTaq DNA 聚合酶 5,000 units
M0481L OneTaq Hot Start DNA Polymerase - 1000 units OneTaq 熱啟動 DNA 聚合酶 1,000 units
M0481S OneTaq Hot Start DNA Polymerase - 200 units OneTaq 熱啟動 DNA 聚合酶 200 units
M0481X OneTaq Hot Start DNA Polymerase - 5000 units OneTaq 熱啟動 DNA 聚合酶 5,000 units
E0542S Quick Blunting and Quick Ligation Kits - 20 reactions Quick Blunting 快速末端平齊化和 Quick Ligation 快速連接試劑盒 20 rxns
E1201L Quick Blunting Kit - 100 reactions Quick Blunting 快速末端平齊化試劑盒 100 rxns
E1201S Quick Blunting Kit - 20 reactions Quick Blunting 快速末端平齊化試劑盒 20 rxns
M0203L T4 DNA Polymerase - 750 units T4 DNA 聚合酶 750 units
M0203S T4 DNA Polymerase - 150 units T4 DNA 聚合酶 150 units
M0236L T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus) - 1000 units T4 多聚核苷酸激酶（3’磷酸酶活性缺失） 1,000 units
M0236S T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus) - 200 units T4 多聚核苷酸激酶（3’磷酸酶活性缺失） 200 units
M0201L T4 Polynucleotide Kinase - 2500 units T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） 2,500 units
M0201S T4 Polynucleotide Kinase - 500 units T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） 500 units
M0201V T4 Polynucleotide Kinase - 250 units T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK） 250 units
B0201S T4 Polynucleotide Kinase Reaction Buffer - 4 ml T4 多聚核苷酸激酶反應(yīng)緩沖液 4.0 ml
M0267E Taq DNA Polymerase with ThermoPol Buffer - 20000 units Taq DNA 聚合酶（提供 ThermoPol 緩沖液） 20,000 units
M0267L Taq DNA Polymerase with ThermoPol Buffer - 2000 units Taq DNA 聚合酶（提供 ThermoPol 緩沖液） 2,000 units
M0267S Taq DNA Polymerase with ThermoPol Buffer - 400 units Taq DNA 聚合酶（提供 ThermoPol 緩沖液） 400 units
M0267V Taq DNA Polymerase with Thermopol Buffer - 200 units Taq DNA 聚合酶（提供 ThermoPol 緩沖液） 200 units
M0267X Taq DNA Polymerase with ThermoPol Buffer - 4000 units Taq DNA 聚合酶（提供 ThermoPol 緩沖液） 4,000 units
M0273E Taq DNA Polymerase with Standard Taq Buffer - 20000 units Taq DNA 聚合酶（提供標(biāo)準(zhǔn) Taq 緩沖液） 20,000 units
M0273L Taq DNA Polymerase with Standard Taq Buffer - 2000 units Taq DNA 聚合酶（提供標(biāo)準(zhǔn) Taq 緩沖液） 2,000 units
M0273S Taq DNA Polymerase with Standard Taq Buffer - 400 units Taq DNA 聚合酶（提供標(biāo)準(zhǔn) Taq 緩沖液） 400 units
M0273V Taq DNA Polymerase with Standard Taq Buffer - 200 units Taq DNA 聚合酶（提供標(biāo)準(zhǔn) Taq 緩沖液） 200 units
M0273X Taq DNA Polymerase with Standard Taq Buffer - 4000 units Taq DNA 聚合酶（提供標(biāo)準(zhǔn) Taq 緩沖液） 4,000 units
M0320L Taq DNA Polymerase with Standard Taq (Mg-free) Buffer - 2000 units Taq DNA 聚合酶（提供不含 Mg2+ 的標(biāo)準(zhǔn) Taq 緩沖液） 2,000 units
M0320S Taq DNA Polymerase with Standard Taq (Mg-free) Buffer - 400 units Taq DNA 聚合酶（提供不含 Mg2+ 的標(biāo)準(zhǔn) Taq 緩沖液） 400 units
M0525L Quick CIP - 5000 units 快速 CIP 5,000 units
M0525S Quick CIP - 1000 units 快速 CIP 1,000 units
M0525V Quick CIP - 500 units 快速 CIP 500 units
M0250L Mung Bean Nuclease - 7500 units 綠豆核酸酶 7,500 units
M0250S Mung Bean Nuclease - 1500 units 綠豆核酸酶 1,500 units
M0289L Antarctic Phosphatase - 5000 units 熱敏磷酸酶 5,000 units
M0289S Antarctic Phosphatase - 1000 units 熱敏磷酸酶 1,000 units
M0289V Antarctic Phosphatase - 500 units 熱敏磷酸酶 500 units
B0289S Antarctic Phosphatase Reaction Buffer - 6 ml 熱敏磷酸酶反應(yīng)緩沖液 6.0 ml
M0495L Hot Start Taq DNA Polymerase - 1000 units 熱啟動 Taq DNA 聚合酶 1,000 units
M0495S Hot Start Taq DNA Polymerase - 200 units 熱啟動 Taq DNA 聚合酶 200 units
M0371L Shrimp Alkaline Phosphatase (rSAP) - 2500 units 蝦堿性磷酸酶（rSAP） 2,500 units
M0371S Shrimp Alkaline Phosphatase (rSAP) - 500 units 蝦堿性磷酸酶（rSAP） 500 units
M0371V Shrimp Alkaline Phosphatase (rSAP) - 250 units 蝦堿性磷酸酶（rSAP） 250 units


 
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